2. 优化上样pH
pH 值对任何SPE方法都有很大影响，可用于优化化合物在SPE产品上的保留。
例如，反相方法调节pH值以中和分析物上的任何电荷。
这将使它们更具疏水性，提高与树脂的相互作用。对于酸性化合物，将pH值调节2个单位低于pKa；对于碱性化合物，将pH值调节2个单位高于pKa。
3. 优化洗涤和洗脱强度
当时用混合模式或反相SPE产品时，可以调整洗涤和洗脱强度，以获得最
干净的提取物。Log P是一个很好的属性，可帮助您决定如何设置。
高Log P－在洗涤步骤中使用更强的有机强度。
低Log P－降低洗脱溶剂的有机强度，以抑制疏水干扰，同时仍能洗脱所选分析物。
4. 新鲜的标准是*！
一些分析物很容易因热和光而降解，并且在长期存储时会从溶液中沉淀出来。这将影响校准标准和回收率值。在开始之前，请使用新制定的标准开始您的程序。
5. 了解你的吸附剂!
找出您正在使用的吸附剂的pKa，并将其与您的分析物pKa一起使用，在上样和洗涤步骤中调节溶液的pH值，无需去离子化合物和树脂（仅限弱离子树脂）。
6. 吸附剂调节
既然您知道了吸附剂的pKa（步骤5），您的吸附剂床就可以被激活并准备好通过调节来结合分析物。在大多数基于硅胶的SPE吸附剂中，硅胶与官能化部分键合，该部分通常平放在颗粒表面。
调节步骤（使用与水混溶的有机溶剂，例如MeOH）使这些键合的官能团“竖立”在颗粒的顶部，为它们提供最大的表面积，让感兴趣的分析物相互作用／结合。如果吸附剂是水可湿性的，则可能不需要此步骤，但它可以通过对吸附剂床进行溶剂洗涤来提高提取物的清洁度。
7. 顺其自然（流速）
流速对于成功的反相SPE工作流程很重要。保留机制在很大程度上依赖于吸附剂和目标分析物之间相互作用的范德华力。SPE过程中的快速流速会降低目标分析物与吸附剂介质正确结合的能力，并可能导致SPE方法的上样和洗涤步骤出现突破。缓慢而稳定的样品流为最佳。以小于或等于每秒1滴（~1毫升/分钟）的流速为目标。
8．松散包装与复合
松散填充的材料会对吸附剂床造成许多问题，包括沟流、压缩、空隙以及由于松散填充后顶部玻璃料缺乏压缩而导致的床重与床高比差异的不一致（图1.）。所有这些因素都会对测试的回收率和再现性产生负面影响。考虑像Microlute@ CP系列这样的复合产品，这些产品旨在消除这些问题并提高SPE方法的回收率和重现性。
Figure 1. MicroluteTM CP, 复合吸附剂与传统松散填充SPE
9. 洗脱前干燥SPE树脂
二氧化硅在干燥时非常容易受到固定相塌陷的影响。在完成SPE程序的最
后洗涤步骤之前，不要让二氧化硅基树脂在任何时候变干——在上样步骤
中尤其如此。这通过限制分析物和键合相之间可能的相互作用来防止回收
率降低。
以下提示适用于聚合物树脂和二氧化硅树脂：
- 执行清洁步骤后，确保使用真空或正压干燥树脂，直到树脂*干燥（我们建议使用正压／真空至少3分钟）或直到看不到清洗溶剂。
- 如果您的方法需要干燥和重构步骤，干燥树脂会显著缩短干燥时间，大多数洗涤溶剂中都存在水，水比大多数有机溶剂更难蒸发。
- 如果您的方法不需要干燥步骤，则在洗涤步骤后不干燥SPE树脂会导致最终进样溶液的浓度降低，从而导致灵敏度降低。
10. 最佳干燥
确保您的干燥方法足够有力以明显扰乱洗脱溶剂的表面，但不至于导致将溶液从孔中排出的可能性，因为这会导致严重的RSD％和回收率差异。
这可能非常困难，因为溶剂水平会在干燥过程中移动。为了克服这个问题，使用可以编程或自动调整以实现高效溶剂蒸发的蒸发器，例如Porvair Sciences Ultravap@系列蒸发器，它可以在整个过程的所有阶段优化干燥，而没有任何样品污染的风险。
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